胎猪胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定
Isolation, purification ,cultivation and identification of porcine fetus pancreatic duct stem cells in vitro
摘要 目的 建立胎猪胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定的方法.方法 采用胰酶和胶原酶Ⅳ、P消化法分离获得细胞,在含10%胎牛血清的M199培养基中行导管上皮细胞原代培养,而后将血清浓度提高到20%以上继续培养,3~4天后至每个小圆细胞形成一个集落;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)的方法对获得的细胞检测CK19、Pdx-1、NeuroD/Beta2、insulin、Glut-2等基因的表达.结果 成功分离获得胎猪胰腺导管细胞,并证实该细胞为胎猪导管源胰腺干细胞.经检测,细胞表达CK19,Pdx-1,Ght-2,NeuroD/Beta2等胰腺干细胞的标志,而insulin、Neurogenin3阴性表达.结论 该方法可较好地分离纯化出胎猪胰腺导管细胞,经鉴定获得细胞具有胰腺干细胞的特性.
Author: LI Yun-long GUO Xin YANG Xiao-bo HUANG Yue-nan
作者单位: 哈尔滨医科大学附属第二医院普外科,黑龙江哈尔滨,150081 哈尔滨医科大学附属第一医院普外科,黑龙江哈尔滨,150001
刊 名 哈尔滨医科大学学报 ISTICPKU
年,卷(期): 2012, 46(3)
分类号: R-332 R587.1
机标分类号: R55 S8
在线出版日期: 2012年10月29日
基金项目: 黑龙江省自然科学基金资助项目