胎猪胰腺干细胞扩增及诱导
Method for expansion and induction of porcine fetus islet stem cell
摘要 目的 寻找胰腺干细胞扩增方法,为研究糖尿病的细胞治疗提供种子细胞.方法无菌采集胎猪胰腺,经胰酶消化,以含10%血清的RPMI1640培养基培养.细胞长满皿底85%时,用胰酶消化传代,传代5~6次后细胞活力下降,细胞大量死亡漂浮,留下少数贴壁的小圆细胞.将培养基中的血清浓度提高到15%,贴壁的小圆细胞能快速增殖并形成细胞克隆,4~6d便可融汇成单层.采用免疫组织化学方法对所获得的的细胞进行胰腺干细胞特征检测.结果经上述方法处理的细胞具有旺盛的增殖能力,可以连续传代,目前已传至64代.采用免疫组织化学检测细胞表达胰腺干细胞特征性标志物,胰肠同源域因子1(PDX-1)、葡萄糖转运子2(GLUT-2)、巢蛋白、波形蛋白;经诱导后细胞表达胰腺内分泌细胞的标志为胰高血糖素、胰岛素、生长抑索、胰多肽.结论通过该方法可以获得大规模扩增的胰腺干细胞,该细胞在体外诱导可分化形成胰腺内分泌部4种主要细胞.
Author: WANG Yun CHU Yuan-kui YANG Chun-rong WANG Hua-yan DOU Zhong-ying
作者单位: 西北农林科技大学国家干细胞生物技术中心陕西分中心,陕西杨凌,712100
刊 名 解剖学报 ISTICPKU
年,卷(期): 2009, 40(1)
分类号: S185
机标分类号: R31 R32
在线出版日期: 2009年4月30日
基金项目: 国家高技术研究发展计划(863计划),国家自然科学基金