胰腺干细胞与胰岛混合培养对其转化率的影响
Co-culture With islets to make pancreatic stem cells differentiate into insulin-producing cells
摘要 目的 研究胰腺干细胞与胰岛混合培养对增加胎鼠胰腺干细胞向β前体细胞转化率的作用及机制.方法 实验分为胰腺导管干细胞单独培养组(Ⅰ组),胰岛单独培养组(Ⅱ组)及干细胞-胰岛混合培养组(Ⅲ组).Ⅴ型胶原酶消化大鼠胰腺获得胰岛后,使用Ficoll-400梯度离心法纯化胰岛;采用胶原酶消化法获得胎鼠胰腺干细胞进行培养,通过RT-PCR及免疫组织化学染色的方法,检测细胞角蛋白-19(CK-19)、巢蛋白(Nestin)、胰高血糖素和胰岛素等干细胞相关标志物.干细胞诱导培养基中加入纯化的胰岛进行混合培养,通过观察干细胞表达胰岛素的阳性率评价其诱导转化率.结果 V型胶原酶逆行胰管灌注继而Ficoll-400梯度离心可获得生物活性良好的胰岛;所培养的干细胞表达CK-19、Nestin、胰高血糖素,诱导后部分表达胰岛素.干细胞-胰岛混合培养组及干细胞单独培养组诱导后,细胞胰岛素阳性率分别为38.2%和23.9%,差异有统计学意义(P<0.05);CK-19阳性率分别为89.3%和81.6%,其差异亦有统计学意义(P<0.05).结论 胰腺导管干细胞与胰岛混合培养可提高胰腺导管干细胞向β前体细胞的转化率,其作用与CK-19的表达密切相关.
Author: CHENG Zhi-qiang WANG Lei HU San-yuan WANG Tian-tian
作者单位: 山东大学 医学院,济南,250012 山东大学 齐鲁医院普外科,济南,250012 山东大学 附属省立医院普外科,济南,250021
年,卷(期): 2010, 48(6)
分类号: R458.5 R-332
机标分类号: R28 R55
在线出版日期: 2016年11月10日
基金项目: 山东省博士基金资助课题