通过G418处理离体纯化小鼠胰腺上皮细胞
Purification of Pancreatic Epithelial Cells Treated with G418 in Vitro
摘要 目的:探索一种能有效去除成纤维细胞,筛选有较强增殖能力上皮细胞的方法.方法:本研究利用成纤维细胞对G418敏感的特性,在成体小鼠胰腺细胞分离后,采用悬浮细胞直接接种到含30μg/mLG418的培养基中,或细胞贴壁生长汇合至50-70%后用30至100μg/mL之间不同浓度G418处理24h、48h或72h两种方案进行上皮细胞的纯化.结果:在直接接种法培养处理中,存活的大部分细胞为成纤维细胞,上皮细胞的生长受到抑制,无法得到纯化的胰腺上皮集落;而在细胞贴壁生长汇合至50-70%后经G418处理,成纤维细胞随着处理浓度的增加死亡率也在逐渐上升,其中50μg/mLG418处理72小时对去除成纤维细胞效果最佳.结论:G418处理能够有效去除成纤维细胞,分离纯化出一群在离体条件下具有强增殖能力、形成大上皮细胞集落的细胞.该分离纯化方法为今后进一步研究成体胰腺干/祖细胞增殖与分化调控机制等问题奠定基础.
Author: LI Dan FENG Rui-cheng ZHANG Li-xin Guo Fang-qi LIANG Yang TENG Chun-bo
作者单位: 东北林业大学生命科学学院发育生物学研究室,黑龙江,哈尔滨,150040 天津医科大学医学检验学院,天津,300203
刊 名 现代生物医学进展 ISTIC
年,卷(期): 2011, 11(12)
分类号: Q95-3
机标分类号: R33 S71
基金项目: 国家自然科学基金