胰腺干细胞体外培养扩增的方法
A method of pancreatic stem cells culture and amplification in vitro
摘要 背景:胰腺干细胞在体外培养时极易分化,很难获得足够数量的胰腺干细胞.目的:探讨一种简便易行的胰腺干细胞体外扩增培养方法.方法:分离新生昆明小鼠胰腺,原代培养三四天,成纤维细胞中出现呈集落生长的胰腺干细胞后,以0.02%EDTA消减成纤维细胞的数量,降低其比例后继续培养,待细胞铺满培养瓶底的80%时,重复三四次,逐渐提高胰腺干细胞的数量.检测胰腺干细胞特异性标志Nestin.尼克酰胺诱导胰腺干细胞分化;双硫腙染色对胰岛样细胞团进行检测.结果与结论:消减胰腺成纤维细胞的数量及比例后,胰腺干细胞可持续表现出活跃的分裂增殖能力,胰腺干细胞的数量显著增加;细胞保持球形、单个大核、细胞质折光性强、表达(Nestin).扩增的胰腺干细胞,以尼克酰胺诱导后分化为胰岛样细胞团,双硫腙染色阳性.提示,减少共培养中成纤维细胞的比例和数量,有利于胰腺干细胞的增殖,获得较多数量的胰腺干细胞.扩增后的胰腺干细胞仍保持未分化状态,在适当的体外诱导条件下能分化为胰岛样结构,具有一定的分化潜能.
Author: Kou Ya-li Hu Li-xia Li Qin Zhao Wen-jing Chen Wei-ping
作者单位: 广西医科大学组织与胚胎学教研室,广西壮族自治区南宁市,530021 河南省新乡市中心医院产科,河南省新乡市,453000
年,卷(期): 2011, 15(10)
分类号: R394.2
机标分类号: R58 R28
在线出版日期: 2011年6月14日
基金项目: 广西科技厅资助项目,广西科技厅资助项目,广西科技厅资助项目