新生昆明小鼠胰腺干细胞体外分离、培养及自然分化的潜能
In vitro isolation, culture and natural differentiation potential of pancreatic stem cells in newborn Kunming mouse
摘要 背景:关于胰腺干细胞在胰腺组织中的分布情况,以及如何有效的将其分离、体外优化培养,目前仍有一定的困难.目的:从新生昆明小鼠胰腺组织中分离出胰腺干细胞,在体外条件下培养观察其形态学和生物学特征,并进行初步鉴定.方法:取新生SPF级昆明小鼠的胰腺组织,使用Ⅴ型胶原酶消化,采用Percoll不连续密度梯度离心,使胰腺组织内、外分泌部细胞分离,分布在3个不同的密度界面;收集各界面的细胞,以无血清、添加碱性成纤维细胞生长因子和表皮细胞生长因子的DMEM培养基培养.结果与结论:通过细胞形态学和细胞生长特性的观察,结合双硫腙染色证实:采用Percoll不连续密度梯度离心,第一、二密度界面的细胞来源于胰腺内分泌部;第三密度界面细胞来源于胰腺外分泌部.分别从胰腺内、外分泌部获取胰腺组织细胞,在体外培养观察发现均存在一类大、圆、单个核的细胞,呈集落样附壁生长,具有较活跃的分裂增殖能力,碱性磷酸酶染色阳性,表达胰腺干细胞的特异性标志巢蛋白,即为胰腺干细胞;随着体外培养时间的延长,分别表达PDX-1和CK-19,呈现向胰腺内分泌部细胞和外分泌部细胞分化的趋势.
Author: Cen Yan-hui He Guo-zhen Huang Bo Huang Rong-shi Jia Wei Peng Yue Yu Guang-qiang
作者单位: 广西医科大学组胚教研室,广西壮族自治区南宁市,530031
刊 名 中国组织工程研究 ISTICPKU
年,卷(期): 2012, 16(6)
分类号: R394.2
机标分类号: R65 S8
在线出版日期: 2012年4月28日
基金项目: 广西科技厅自然科学基金青年基金,广西教育厅科研项目