药物诱导后的胚胎胰腺干细胞胰岛素分泌的研究
目的:探索胚胎胰腺干细胞经药物诱导成为胰岛素分泌细胞(IPCs)后胰岛素的分泌情况,为临床上寻求最佳移植时间提供理论依据。<br>   方法:1.取引产14-20周的人胚胎,体外分离出的胚胎胰腺,免疫组织化学方法鉴定巢蛋白阳性细胞,培养获得胚胎胰腺干细胞。<br>   2.经药物诱导若干天后,双硫腙(DTZ)染色鉴定诱导后的细胞是否成为胰岛素分泌细胞(IPCs)。<br>   3.分别用高浓度(20mmol/L)和低浓度(5.5mmol/L)的葡萄糖溶液刺激诱导后的细胞,利用酶联免疫吸附实验(ELISA)的方法测定其分别在高低浓度糖溶液刺激下胰岛素释放情况;并用ELISA检测糖溶液刺激...
目的:探索胚胎胰腺干细胞经药物诱导成为胰岛素分泌细胞(IPCs)后胰岛素的分泌情况,为临床上寻求最佳移植时间提供理论依据。
   方法:1.取引产14-20周的人胚胎,体外分离出的胚胎胰腺,免疫组织化学方法鉴定巢蛋白阳性细胞,培养获得胚胎胰腺干细胞。
   2.经药物诱导若干天后,双硫腙(DTZ)染色鉴定诱导后的细胞是否成为胰岛素分泌细胞(IPCs)。
   3.分别用高浓度(20mmol/L)和低浓度(5.5mmol/L)的葡萄糖溶液刺激诱导后的细胞,利用酶联免疫吸附实验(ELISA)的方法测定其分别在高低浓度糖溶液刺激下胰岛素释放情况;并用ELISA检测糖溶液刺激下该细胞群2周内胰岛素的分泌情况。
   结果:1.免疫组织化学检测得到巢蛋白阳性细胞,证明胰腺干细胞的存在。
   2.诱导后细胞可被DTZ染色成猩红色,证明IPCs形成。
   3.经诱导后IPCs在两种浓度糖溶液刺激下均分泌胰岛素,且高糖溶液刺激下胰岛素分泌量明显高于低糖溶液,分别为[(137.41±6.02)U/L,(106.40±8.61)U/L,t=7.228,P<0.01)]。IPCs在糖溶液刺激下第7天与第9天的胰岛素分泌量明显高于其他各天(F=38.373,q=3.033~6.085,P<0.05);第7天与第9天比较差异无统计学意义(P>0.05)。
   结论:离体条件下,胚胎胰腺干细胞经药物诱导后可分化为具有分泌胰岛素能力的细胞,该细胞在糖溶液刺激下两周内可持续分泌胰岛素,其分泌量在7-9天达到最大值。
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作者: 孟娟
学科专业: 临床检验诊断学
授予学位: 硕士
学位授予单位: 青岛大学
导师姓名: 吴春梅
学位年度: 2013
语 种: chi
分类号: R587.105
在线出版日期: 2013年10月30日