LAMP反应体系/分体系的分割处理和常温运输方法

本发明公开了一种LAMP反应体系/分体系的分割处理和常温运输方法,该方法以无菌无纺布/无菌无毛纸作为LAMP反应体系/分体系的无菌载体,首先将LAMP反应体系/分体系与海藻糖混合,得到混合液;再将无菌载体放入混合液中,充分浸润;再利用冷冻干燥机对上述的无菌载体进行冷冻干燥处理;最后将冷冻的无菌载体通过切割仪器进行等量切割,一管化分装,常温保存或运输。本发明将酶组分和PCR反应液组分分别固定在不同的无菌载体上,等量切割后按需求放入反应管内,重新组合成一管式LAMP反应体系,既避免了常规一管式混合冻干法假阳性率高的问题,又延长了LAMP反应体系的常温保存或运输期限。

专利类型: 发明专利
申请(专利)号: CN202011617344.9
申请日期: 2020年12月31日
公开(公告)日: 2021年4月13日
公开(公告)号: CN112646863A
主分类号: C12Q1/6844,C,C12,C12Q,C12Q1
分类号: C12Q1/6844,B65B5/04,C,B,C12,B65,C12Q,B65B,C12Q1,B65B5,C12Q1/6844,B65B5/04
申请(专利权)人: 陈晓东
发明(设计)人: 陈晓东
主申请人地址: 530000 广西壮族自治区南宁市西乡塘区大岭路98号
专利代理机构: 武汉开元知识产权代理有限公司
代理人: 胡镇西
国别省市代码: 广西;45
主权项: 1.一种LAMP反应体系/分体系的分割处理和常温运输方法,其特征在于:包括以下步骤: 1)将LAMP反应体系/分体系与海藻糖混合,得到混合液; 2)将无菌载体放入混合液中,充分浸润;再利用冷冻干燥机对上述的无菌载体进行冷冻干燥处理;其中,所述无菌载体为无纺布/无毛纸; 3)最后将冷冻的无菌载体通过切割仪器进行等量切割,一管化分装,常温保存或运输。 2.根据权利要求1所述LAMP反应体系/分体系的分割处理和常温运输方法,其特征在于:所述步骤1)中,每毫升的混合液中,海藻糖的含量为0~15g。 3.根据权利要求2所述LAMP反应体系/分体系的分割处理和常温运输方法,其特征在于:所述混合液为LAMP反应体系与海藻糖混合时,每毫升的混合液中,海藻糖的含量为10~15g。 4.根据权利要求3所述LAMP反应体系/分体系的分割处理和常温运输方法,其特征在于:所述LAMP反应体系为DNA扩增体系时,包括引物、dNTPs、Bst DNA聚合酶、核酸扩增的反应缓冲液; 或者,所述LAMP反应体系为RNA扩增体系时,包括引物、dNTPs、Bst DNA聚合酶、核酸扩增的反应缓冲液、逆转录酶/反转录酶。 5.根据权利要求2所述LAMP反应体系/分体系的分割处理和常温运输方法,其特征在于:所述混合液为LAMP反应分体系与海藻糖混合时, 若LAMP反应分体系为酶组分体系,每毫升的混合液中,海藻糖的含量为10~15g; 或者,若LAMP反应分体系为PCR反应液组分体系,海藻糖的含量为0~15g;PCR反应液组分体系包含引物、dNTPs。 6.根据权利要求5所述LAMP反应体系/分体系的分割处理和常温运输方法,其特征在于:所述酶组分体系为DNA酶组分体系,包括Bst DNA聚合酶、核酸扩增的反应缓冲液; 所述酶组分体系为RNA酶组分体系,包括Bst DNA聚合酶、dNTPs和逆转录酶或者BstDNA聚合酶、核酸扩增的反应缓冲液和反转录酶。 7.根据权利要求4或6所述LAMP反应体系/分体系的分割处理和常温运输方法,其特征在于:所述d NTPs为d ATP、d TTP、d GTP和d CTP的混合物;所述Bst DNA聚合酶为同时具有5′→3′聚合酶活性和链替代活性的DNA聚合酶。 8.根据权利要求1所述LAMP反应体系/分体系的分割处理和常温运输方法,其特征在于:所述步骤2)中,冷冻干燥处理时间为2小时。 9.一种权利要求1所述LAMP反应体系/分体系的分割处理和常温运输方法得到的无菌载体的使用方法,其特征在于,包括以下步骤: a.向含有LAMP反应体系的无菌载体的反应管内加水,溶解得到LAMP反应体系,用于LAMP扩增反应; 或者,b.向含有多个LAMP反应分体系的无菌载体的反应管内加水,溶解得到LAMP反应体系,用于LAMP扩增反应。
法律状态: 公开