超氧化物歧化酶固体制剂及其制备方法

本发明提出了超氧化物歧化酶固体制剂及其制备方法,所述超氧化物歧化酶固体制剂含有超氧化物歧化酶,其中,所述超氧化物歧化酶预先经过高压激活处理。预先将经过高压激活处理的超氧化物歧化酶制成固体制剂,可以有效地避免经高压激活处理而改变的超氧化物歧化酶构象恢复,从而避免酶活降低,使其长时间处于高酶活状态,延长保质期,可应用于食品、医药和化妆品领域中,应用前景广泛。

专利类型: 发明专利
申请(专利)号: CN202010362023.2
申请日期: 2020年4月30日
公开(公告)日: 2020年6月12日
公开(公告)号: CN111265657A
主分类号: A61K38/44,A,A61,A61K,A61K38
分类号: A61K38/44,C12N15/53,A23L29/00,A61K9/14,A61K9/19,A61K45/06,A61P39/06,A61K8/66,A61K8/02,A61Q19/08,C12N9/02,A,C,A61,C12,A23,A61K,C12N,A23L,A61P,A61Q,A61K38,C12N15,A23L29,A61K9,A61K45,A61P39,A61K8,A61Q19,C12N9,A61K38/44,C12N15/53,A23L29/00,A61K9/14,A61K9/19,A61K45/06,A61P39/06,A61K8/66,A61K8/02,A61Q19/08,C12N9/02
申请(专利权)人: 中国农业大学
发明(设计)人: 廖小军,赵靓,王永涛,杨焕治
主申请人地址: 100094 北京市海淀区圆明园西路2号
专利代理机构: 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人: 肖阳
国别省市代码: 北京;11
主权项: 1.一种超氧化物歧化酶固体制剂,其特征在于,含有超氧化物歧化酶, 其中,所述超氧化物歧化酶预先经过高压激活处理。 2.根据权利要求1所述超氧化物歧化酶固体制剂,其特征在于,所述超氧化物歧化酶来源于可食用植物或微生物, 所述可食用植物选自猕猴桃、木瓜、柠檬、桑葚、沙棘、蓝莓或刺梨; 所述微生物选自大肠杆菌或酵母菌。 3.根据权利要求1所述超氧化物歧化酶固体制剂,其特征在于,所述超氧化物歧化酶固体制剂进一步含有益生元和益生菌的至少之一。 4.根据权利要求1所述超氧化物歧化酶固体制剂,其特征在于,所述超氧化物歧化酶具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列具有至少80%同源性的同源氨基酸序列,所述同源氨基酸序列中第15位为T、第67位为G、第87位为I、第143位为V; 编码所述超氧化物歧化酶的核苷酸序列为SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列或者与SEQID NO:2所示的核苷酸序列具有至少80%同源性的同源核酸序列,所述同源核酸序列中第43位至第45位为ACG,第199位至第201位为GGC,第259位至第261位为ATT,第427位至第429位为GTA。 5.根据权利要求2所述超氧化物歧化酶固体制剂,其特征在于,所述微生物为基因工程菌,所述基因工程菌中含有连接有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列或者所述同源核酸序列的表达载体。 6.根据权利要求1所述超氧化物歧化酶固体制剂,其特征在于,所述超氧化物歧化酶的酶活力不低于2×105 U/g; 所述超氧化物歧化酶固体制剂在4℃下保存60天后,所述超氧化物歧化酶的活性降低不大于20%。 7.一种制备权利要求1~6任一项所述超氧化物歧化酶固体制剂的方法,其特征在于,包括: 对原料进行提取处理,以便得到含有超氧化物歧化酶的提取物; 对所述提取物进行高压激活处理,以便得到激活产物; 将所述激活产物进行干燥处理,以便得到所述超氧化物歧化酶固体制剂。 8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述高压激活处理的压力为200~600MPa,时间为1~20 min,温度为6~18℃; 所述方法进一步包括:将所述超氧化物歧化酶固体制剂置于真空包装容器中,并进行抽真空、充气和热封处理; 其中,填充的气体选自CO2和N2的至少之一,气体体积单位为ml;SOD酶重量单位为g,所述超氧化物歧化酶重量与气体总体积比为1:0.2~1:2。 9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,获得所述提取物的方法包括: 将可食用植物或含有微生物的发酵液进行细胞破碎处理,制成浆液,以便得到所述提取物。 10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,获得所述提取物的方法进一步包括下列至少之一的步骤: 将所述浆液进行过滤及离心处理,收集上清液; 对所述上清液进行双道超滤分离处理,收集截留液,以便得到所述提取物; 所述细胞破碎处理制成浆液的过程中体系温度为0~30℃; 所述离心处理的转速为1000~4000 rpm,温度为0~10℃,时间为0~30 min且不为0min; 所述双道超滤分离处理中,第一次分离采用管式膜,孔径为60~120 kD;第二道分离采用卷式膜,孔径为8~30 kD。 11.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述微生物为基因工程菌,所述基因工程菌中含有连接有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列或者所述同源核酸序列的表达载体。 12.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述干燥处理包括冷冻干燥处理和/或喷雾干燥处理。 13.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,进行所述干燥处理之前,预先将所述激活产物与助干剂混合,所述助干剂为β-环糊精、麦芽糊精和/或可溶性淀粉,所述助干剂的添加量为0~50质量%; 所述冷冻干燥处理的冷阱温度为-45 ℃~-80 ℃,真空度为15~30 Pa,干燥时间为12~48 h; 所述喷雾干燥处理的进风口温度为140~180 ℃,出风口温度为55~70 ℃,进料流量为3~12 mL/min。
法律状态: 公开,公开