一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物及其应用

一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物及其应用,其特征是所述组合物由作为活性成分脂肪干细胞外泌体及至少一种可以皮肤外用的辅料组成,所述作为活性成分脂肪干细胞外泌体的重量百分比用量为0.002%~0.005%。

专利类型: 发明专利
申请(专利)号: CN202010402978.6
申请日期: 2020年5月13日
公开(公告)日: 2020年6月19日
公开(公告)号: CN111297900A
主分类号: A61K35/28,A,A61,A61K,A61K35
分类号: A61K35/28,A61K47/36,A61P17/16,A61P17/18,C12N5/0775,A,C,A61,C12,A61K,A61P,C12N,A61K35,A61K47,A61P17,C12N5,A61K35/28,A61K47/36,A61P17/16,A61P17/18,C12N5/0775
申请(专利权)人: 优赛生命科技有限公司
发明(设计)人: 陈晓波,张健,韩洪起,冯春玲
主申请人地址: 300000 天津市滨海新区经济技术开发区信环北街36号A座-3楼
专利代理机构: 天津合正知识产权代理有限公司
代理人: 马云云
国别省市代码: 天津;12
主权项: 1.一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物,其特征是所述组合物由作为活性成分脂肪干细胞外泌体及至少一种可以皮肤外用的辅料组成,所述作为活性成分脂肪干细胞外泌体的重量百分比用量为0.002%~0.005%,所述的脂肪干细胞外泌体以如下方法制备: A)将脂肪间充质干细胞,接种于第一培养基中,所述第一培养基为含第一诱导培养试剂的基础培养基,所述基础培养基为低糖DMEM培养基,所述诱导培养试剂为地塞米松、维生素C、维生素D3和1-甲基-3-异丙基-黄嘌呤(IBMX),所述第一诱导培养试剂在培养基中的用量为:地塞米松1μmol/L,维生素C 50mg/L,维生素D310~15μmol/L,1-甲基-3-异丙基-黄嘌呤0.2~0.3mmol/L;将接种了脂肪间充质干细胞的培养基于5%CO2 37℃的条件下培养48h,然后吸除培养基,加入低糖DMEM培养基,培养24h后收集上清作为上清液A; B)将脂肪间充质干细胞,接种于第二培养基中,所述第二培养基为含有第二诱导培养试剂的基础培养基,所述第二诱导培养试剂为维甲酸和β-甘油磷酸钠,维甲酸在培养基中的用量为:维甲酸0.5~1μmol/L,β-甘油磷酸钠2~4mmol/L,将接种了脂肪间充质干细胞的培养基于5%CO2,37℃的条件下培养48h,然后吸除培养基,加入低糖DMEM培养基,培养24h后收集上清作为上清液B; C)分别从上清液A和上清液B中提取外泌体后合并作为组合物活性成分的脂肪干细胞外泌体,上清液A提取的外泌体与上清液B提取的外泌体的蛋白质质量比为1:0.5~1.5。 2.如权利要求1所述的一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物,其特征是上清液A提取的外泌体与上清液B提取的外泌体的蛋白质质量比为1:0.8~1.2。 3.如权利要求2所述的一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物,其特征是上清液A提取的外泌体与上清液B提取的外泌体的蛋白质质量比为1:1。 4.如权利要求1~3任一所述的一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物,其特征是所述的步骤C)中外泌体的提取方法包括以下步骤: C1)将收集的培养液上清300g离心10min,保留上清液,弃沉淀,去除培养液中的细胞; C2)步骤C1)得到的上清液2000g~3000g离心20min~30min,保留上清液,弃沉淀,去除细胞碎片; C3)步骤C2)得到的上清液10000g离心60min~100min,保留上清液,弃沉淀,再次去除细胞碎片; C4)步骤C3)上清液100000g离心60min~120min,弃上清,保留沉淀作为提取的外泌体。 5.如权利要求4所述一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物,其特征是所述作为活性成分脂肪干细胞外泌体的以蛋白质质量计的重量百分比用量为0.002%~0.005%,所述可以皮肤外用的辅料为羟乙基淀粉130/0.4,氯化钠、pH调节剂、卡波姆934、蛋黄磷脂、维生素E和余量的水,所述羟乙基淀粉130/0.4的重量百分比用量为0.3~0.5%,所述氯化钠的重量百分比用量为0.6%~0.8%,所述pH调节剂为三乙醇胺,所述蛋黄磷脂的重量百分比用量0.5%~1%,所述维生素E的重量百分比用量为0.1%~0.2%,所述卡波姆934用量为0.1%~0.3%。 6.如权利要求5所述的一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物,其特征是优选所述作为活性成分脂肪干细胞外泌体的重量百分比用量为0.003%~0.004%,所述羟乙基淀粉130/0.4的重量百分比用量为0.4%,所述蛋黄磷脂的重量百分比用量0.8%~1%,所述维生素E的重量百分比用量为0.2%,所述卡波姆934用量为0.2%。 7.如权利要求5或6所述的一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物,其特征是所述组合物的制备方法包括以下步骤: 1)将蛋黄卵磷脂分散于处方量30%~40%的水中,依次加入处方量维生素E和脂肪干细胞外泌体,于35~45℃温度下以高压乳匀机处理成为乳状液; 2)将羟乙基淀粉和氯化钠溶于适量水中得到溶液; 3)将卡波姆934分散于适量水中充分溶胀,然后搅拌加入三乙醇胺至pH为7,步骤1)得到的乳状液和步骤2)得到的溶液分别缓慢加入,补足余量的水即得所述组合物。 8.如权利要求1~7所述任一一种富含脂肪干细胞外泌体的组合物在制备抗皮肤老化药物中的应用。
法律状态: 公开