利用家蚕高效表达天花粉蛋白及其他有用蛋白的方法

本发明通过基因工程技术,从家蚕核多角体病毒HB分离株中克隆了含多角体蛋白基因的片段,利用PCR定点突变法,构建了新型高效家蚕核多角体病毒转移载体质粒。该质粒的5'及3'端同源序列区小于普通转移载体质粒,适合于基因工程的操作。多角体蛋白基因启动子的结构完整,有利于高效表达。3'端引入了三套TAA终止密码,可以有效地终止外源基因的翻译。中间的多聚克隆位点适合于外源基因的插入。天花粉蛋白基因被插入到该质粒,并由些构建了含天花粉蛋白基因的重组家蚕核型多角体病毒,并在家蚕活体内表达了该基因。

专利类型: 发明专利
申请(专利)号: CN91110465.8
申请日期: 1991年11月12日
公开(公告)日: 1992年6月17日
公开(公告)号: CN1062001
主分类号: C12N15/29,C12N15/00,C,C12,C12N,C12N15
分类号: C12N15/29,C12N15/00,C,C12,C12N,C12N15
申请(专利权)人: 北京大学
发明(设计)人: 储瑞银,陈章良,鲍一明,林玉莲
主申请人地址: 100871北京市海淀区
专利代理机构: 北京大学专利事务所
代理人: 孙博宁
国别省市代码: 北京;11
主权项: 本发明属于基因工程领域,是一种以家蚕核型多角体病毒为载体,利用家蚕表达天花粉蛋白及其他有用蛋白质的方法。其特征在于利用构建的新型家蚕核型多角体病毒载体质粒,通过与野生型家蚕核多角体病毒在培养细胞中进行同源重组,获得重组病毒,在家蚕体内表达自然界难以大量获得的天花粉蛋白。本方法适合于利用同样方法表达其他外源基因。权利要求为:1、含有家蚕核型多角体病毒HB分离株多角体蛋白基因的EcoRI10.6kb片段及XhoI-BamHI3.8kb片段,以及由XhoI-BamHI片段引伸而来的一系列亚克隆片段。
法律状态: 实质审查请求已生效的专利申请,公开,专利申请的视为撤回