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羽色是家禽品种鉴定的关键表型特征之一,解析其遗传基础对种质资源的保护与可持续利用具有重要意义.本研究对 127 只广东黑鸽和 12 只塔里木鸽进行全基因组重测序(whole-genome resequencing,WGR),并整合其他 4 个鸽种已有的重测序数据(共 40 只),通过主成分分析、群体结构分析和系统进化树构建发现,广东黑鸽遗传背景独特,与白羽及灰羽鸽群存在明显分化.进一步利用全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS),经过过滤筛选后共得到 1,598 个单核苷酸多态性(single-nucleotide polymorphism,SNP)位点和97 个插入/缺失(insertion/deletion,InDel)位点,这些位点集中分布于 4 号染色体内皮素 B 型受体亚型(endothelin receptor type B2,EDNRB2)基因及其邻近区域.本研究从该区域挑选显著性较高的 3 个 SNP 位点和2 个 InDel 位点进行 Sanger 测序验证,结果显示:白羽鸽所有位点均为野生型,广东黑鸽全部位点均为突变纯合型或杂合型,说明这些变异位点的基因型与黑羽表型高度一致.本研究结果为解析广东黑鸽羽色形成的分子机制、开展分子标记辅助育种提供了可靠的候选标记.
广东黑鸽羽色全基因组关联分析分子标记
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研究旨在探究0.26%色氨酸对哺乳期第7天种鸽性腺、嗉囊发育及机体代谢的影响.试验选取120对12~16月龄繁殖性能相近的米玛斯种鸽,随机分为对照组(饲喂含0.10%色氨酸基础饲粮)和试验组(饲喂含0.26%色氨酸试验饲粮),每组10个重复,每个重复6对种鸽,每对种鸽哺育4只乳鸽.试验期含17 d孵化期和7 d哺乳期.结果显示:①0.26%色氨酸饲粮对公鸽睾丸重和母鸽卵巢重、黄卵泡、白卵泡数量和直径均无显著影响(P>0.05).②0.26%色氨酸饲粮对种鸽嗉囊厚度、重量、催乳素水平及鸽乳分泌量无显著影响(P>0.05);性别差异上,公鸽体重显著高于母鸽(P<0.05),但嗉囊厚度显著低于母鸽(P<0.05);且色氨酸水平与性别对鸽乳免疫球蛋白G和α-酪蛋白含量存在显著交互作用(P<0.05).③0.26%色氨酸饲粮可显著提高种鸽血浆甘油三酯、总蛋白和白蛋白含量(P<0.05);性别差异上,公鸽血浆葡萄糖和白蛋白含量显著高于母鸽(P<0.05);且色氨酸水平与性别对白蛋白含量存在显著交互作用(P<0.05).④0.26%色氨酸饲粮可显著降低种鸽血浆丙氨酸氨基转移酶活性和嗉囊丙二醛含量(P<0.05),显著提高肝脏总抗氧化能力(P<0.05);性别差异上,母鸽肝脏过氧化氢酶活性显著高于公鸽(P<0.05).研究表明,饲喂0.26%色氨酸饲粮对哺乳期第7天种鸽的性腺、嗉囊发育影响较小,但能够改善哺乳期第7天种鸽血浆、肝脏及嗉囊代谢指标,提高机体抗氧化能力,并促进公鸽鸽乳中免疫球蛋白和酪蛋白分泌.
色氨酸种鸽性腺发育嗉囊发育氧化应激
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原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)是产生精子和卵子的生殖前体细胞,负责将遗传信息传递至后代,其可分离性、体外可培养性、发育全能性为遗传资源保护、生物育种、基因编辑、生殖疾病诊疗等提供了有力工具.鸽作为重要的农业动物和模式生物,同人类生活和科学研究有重要关系.文章综述了鸽原始生殖细胞的迁移、培养及可能存在的关键问题,并探讨了鸽PGCs在基因编辑、遗传资源保存等领域的应用潜力,以期为鸽PGCs冷冻保存、基因编辑生物育种研究和生物技术创新提供理论支持.
原始生殖细胞鸽迁移培养基因编辑
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本文结合皖北地区肉鸽在选种、产孵、育雏、换羽和日常管理等关键生产环节的实践经验,从遗传改良、营养调控、环境优化、行为规范与健康保障5个维度,提出了繁殖力提升路径.选种方面,选择生长快、产量高、适应性广、抗病力强的优良种鸽,并通过动态评估,结合纯种扩繁、家系选择与个体选择,优选遗传稳定、繁殖力高、育雏性好和乳鸽生长快的种鸽;配对时采用同质选配为主、异质选配为辅的方式,确保科学配对.产蛋与孵化方面,根据体重情况合理调配日粮,供给适宜保健沙(粗砂、红土、贝壳粉、骨粉等),备足鸽笼(长45~50 cm、宽40~45 cm、高50 cm)与巢窝(直径25~30 cm,深度8~10 cm),并辅以人工孵化,孵化温度37.8~38.2℃,全程观察剔除无精蛋和死胚蛋.育雏管理方面,精心饲喂亲鸽(豆类35%~40%,能量饲料60%~65%),适时调教、并雏,合理利用健康无病、孵育能力强、精神状态佳的保姆鸽,当出现弃雏或弱雏时采取人工哺育.夏末秋初采取人工措施(第1天断料不断水,第2-3天断料断水,然后逐渐添加日粮)进行强制换羽.日常管理方面,提供适宜环境(舍饲密度≤3对/m2,夏季降温、冬季保温,相对湿度在55%~65%),保证清洁饮水,强化疫病防控(接种新城疫灭活苗、禽流感疫苗等),做好系谱、生产、管理等记录.本文为肉鸽养殖提供参考.
肉鸽繁殖力选种配对孵化育雏
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试验旨在建立检测鸽A群轮状病毒的TaqMan RT-qPCR方法.试验通过比对NCBI数据库中收录的鸽源A群轮状病毒VP6基因序列,筛选出104 bp保守区域,针对其设计特异性TaqMan探针,并进行敏感性、特异性、重复性试验,通过检测临床样品比较与常规PCR检测结果的符合率.结果显示:当引物浓度和探针浓度分别为0.5 µmol/L和0.4 µmol/L,退火温度为58℃时,建立的TaqMan RT-qPCR扩增效果较好,检出限为1×100 copies/µL,较常规PCR方法高1 000倍;该方法特异性良好,与其他常见鸽源病毒(鸽疱疹病毒、鸽腺病毒、鸽圆环病毒、新城疫病毒)无交叉反应,重复性高,组内、组间变异系数均小于1%,应用该方法对98份临床样品的检测结果与常规PCR检测结果符合率为87.8%.研究表明,试验建立的TaqMan RT-qPCR为鸽A群轮状病毒的检测提供了快速且灵敏的方法,为其流行病学调查、早期预警和有效防控提供了重要的技术支持.
鸽轮状病毒VP6蛋白TaqMan RT-qPCR流行病学
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年出雏数是评价鸽生产能力的重要指标,本研究拟通过筛选与石岐鸽年出雏数性状相关的分子标记及候选基因,为解析出雏数性状的遗传机制及分子育种提供理论支撑.以石岐鸽3个世代群体作为研究对象,统计每只母鸽的年出雏数,采集血液进行基因组重测序,使用GMAT软件进行全基因组关联分析(GWAS),鉴定与鸽年出雏数性状相关的 SNPs 位点和候选基因.结果显示,石岐鸽年出雏数平均为 16.09 只.280 个鸽样本测序共产生 3 710.96 Gb 原始数据,平均测序深度为 9.92×,过滤后分别获得 1 840 541 115 个 SNPs 位点和272 982 269 个 InDel 位点.GWAS 结果共鉴定出 42 个突变位点与鸽年出雏数性状显著相关,对显著位点进行注释,共鉴定到 31 个候选基因,其中较为显著的位点主要聚集于第 2 和 10 号染色体上,这些区域内注释到MYOM1、CHST9、CDH2、CHDH、CACNA2D3、TXNRD3等候选基因.单倍型分析结果显示,2 号染色体上存在 1 个显著关联的单倍型区块,其中MYOM1基因在显著的 block 区块中被注释到;10 号染色体上存在 4 个显著关联的单倍型区块,其中CACNA2D3基因在显著的 block 区块中被注释到.挑选出 10 个代表性 SNPs 与鸽年出雏数数据进行关联性分析,其中大部分 SNPs 与鸽年出雏数性状呈显著或极显著相关.本研究利用 GWAS 方法筛选出MYOM1、CDH2、CHDH、CACNA2D3、TXNRD3等基因为鸽年出雏数性状的候选基因,研究结果为鸽出雏能力的分子标记辅助选育提供了理论支撑.
鸽年出雏数全基因组关联分析
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为建立一种快速滤过式固相萃取结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测禽蛋中甲氧苄啶残留的测定方法,试验样品用 90%乙腈水溶液提取,PRiME HLB 滤过式固相萃取柱净化,以 0.1%甲酸水溶液和乙腈作为流动相经 Agilent Eclipse C18 色谱柱分离,多反应监测模式下正离子模式扫描,超高效液相色谱-串联质谱仪分析测定.结果显示:甲氧苄啶在 0.5~50.0 μg/L 范围内呈良好线性关系(r2≥0.9983),方法检出限为 0.5 μg/kg,定量限为 1.0 μg/kg.甲氧苄啶在鸡蛋、鸭蛋、鸽蛋中 3 个添加浓度水平(1.0、2.0、10 μg/kg)下,平均回收率为76.4%~94.1%,批内相对标准偏差(RSD,n=6)≤13.7%,批间RSD(n=18)≤7.9%.研究结果表明,建立的 UPLC-MS/MS 法前处理操作简便、快速,具有高灵敏度、准确度和精密度,适用于禽蛋中甲氧苄啶残留的测定.
甲氧苄啶鸡蛋鸭蛋鸽蛋PRiME HLBUPLC-MS/MS
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本试验旨在研究亲鸽饲粮胆碱缺乏对 21 日龄乳鸽生长性能、免疫器官发育、免疫功能及免疫相关基因表达的影响.选取 24 月龄欧洲米玛斯肉种鸽 72 对和 1 日龄乳鸽 288 只,随机分为 2 组,每组 12 个重复,每重复 3 对种鸽和 12 只乳鸽.对照组基础饲粮中添加 1 200 mg/kg 胆碱,实测胆碱含量为 1 510 mg/kg;胆碱缺乏组基础饲粮不额外添加胆碱,实测胆碱含量为 650 mg/kg,采用"2+4"饲养模式,试验期 21 d.结果表明:与对照组相比,胆碱缺乏组 21 日龄乳鸽的体重和乳鸽平均日增重均降低(P<0.05),耗料增重比升高(P<0.05);脾脏重量和法氏囊重量均降低(P<0.05),脾脏指数和法氏囊指数均降低(P<0.05);形态学检测表明,胆碱缺乏组乳鸽胸腺小叶轮廓不清,皮质与髓质分界模糊,其髓质内胸腺细胞减少并出现腔隙和空泡;脾脏中的白髓面积减少,其内脾小结和脾动脉周围淋巴鞘减少,脾小结面积、红髓内脾索、脾窦内血细胞均减少;血清促炎性细胞因子 IL-6 升高(P<0.05);胸腺发育及免疫因子相关基因CXCR4、CAMP、IL-6、IL-13RA2、IL-10和TLR4的 mRNA 表达量降低(P<0.05),而CATH3和IL-18的 mRNA 表达量升高(P<0.05);脾脏发育及免疫因子相关基因FAS和IL-1β的 mRNA 表达量降低(P<0.05),而CXCR4、CAMP、CXCL12、IL-13RA2、IL-10、IL-12A、TLR4、IFN-γ、TNFα3、Bcl2以及IL-18基因的 mRNA 表达量升高(P<0.05).综合分析可见,亲鸽饲粮胆碱缺乏可通过抑制免疫器官组织结构发育和调控免疫相关基因表达抑制 21 日龄乳鸽的生长与免疫功能.
胆碱免疫器官发育免疫功能基因乳鸽
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为解析肉鸽体尺性状的遗传基础和分子机制,研究基于欧洲肉鸽28日龄个体的全基因组重测序数据,对龙骨长、体斜长、胫长和胫围4个体尺性状开展了全基因组关联分析.结果显示:共获得约2.03×106 个高质量SNPs,鉴定到62个达到基因组显著水平的变异位点.其中,chr6:22059988位点与龙骨长显著相关(P=2.55×10-7),并注释到SORBS1基因;chr19:10281439位点与体斜长显著相关(P=1.17×10-6),对应GRIN1基因;胫长性状的显著位点 chr3:25507405(P=2.32×10-7)注释到 GCLC 基因;胫围性状的显著位点 chr15:10913640(P=2.51×10-7)注释到LCORL基因.功能注释和通路富集分析表明,上述候选基因主要参与骨骼发育、钙信号调控及氧化还原稳态等关键生物学过程,对肉鸽体尺性状形成具有潜在重要作用.结果表明,肉鸽体尺性状在早期阶段已呈现多基因调控特征,不同性状间遗传效应存在差异,其中龙骨长性状检测到较高效应位点,而其余性状以中等效应位点为主,相关位点可为体尺性状的分子标记筛选提供理论参考.
鸽体尺性状全基因组关联分析候选基因
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鸽毛滴虫病是由禽毛滴虫引起的常见寄生性原虫病,病变主要位于口腔、咽喉及上消化道黏膜,形成典型的干酪样坏死性溃疡.该病是严重危害鸽养殖业的重要疫病之一,在世界各地均有流行,乳鸽和青年鸽易感性强、感染率高.该病继发或混合感染常导致高死亡率.本文阐述其病原学、流行病学、临床特征及病理变化,重点介绍了常用的诊断方法,并梳理了当前中西医治疗药物与综合防控策略,为该病的科学防控提供参考.
鸽毛滴虫病临床诊断综合防治中药治疗耐药性